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Albumin-Venus IPSC基因原位敲入人多能干细胞单克隆细胞株 

细胞株简介:

多能干细胞具有体外扩增、多向分化的能力,其定向分化的肝脏样细胞(hepatocyte like cells, HLCs)是肝脏疾病模拟、毒理检测以及肝脏移植供体的潜在重要细胞来源。但目前得到的HLCs普遍存在成熟度不够、纯度不够的问题,限制了其在基础科学和转化医学方面的应用。

白蛋白(albumin)是干细胞在成熟分化过程中肝脏分化成熟的标志物。杭州观梓健康科技有限公司利用新型基因编辑技术,构建的Albumin-Venus IPSC人多能干细胞单克隆细胞株,在健康人的DiPS 1016 SevA人多能干细胞株基因组中的Albumin基因位点原位敲入报告基因绿色荧光蛋白Venus表达框,建立了一个可通过绿色荧光蛋白表达水平来体现肝脏分化成熟marker Albumin基因表达水平的高效、稳定单克隆细胞株体系,可用于研究人多能干细胞的体外定向分化为肝脏细胞,也可对干细胞分化的批次间差异进行评判检测,同时也为肝脏疾病模拟、毒理检测及药物筛选提供了有力工具。

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应用案例

在Albumin-Venus IPSC单克隆细胞株中用全基因组敲除文库(GeCKO)筛选参与调节肝样细胞分化的关键基因,成功筛选出关键基因TIMP3RAB3-GAP1ATG7RPS6KA2HDAC3等。

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在Albumin-Venus IPSC单克隆细胞株体外分化为肝样细胞的过程中,高通量筛选可以促进人多能干细胞体外分化为成熟肝样细胞的化合物,成功筛选出化合物CI-994,并在多种人多能干细胞株中证明了该化合物具有体外促进人多能干细胞分化为成熟肝样细胞的真实作用。

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已发表文献:Shuang Li, Zhen Shao, Yongxu Zhao, Qiurong Ding et al. Genetic and Chemical Screenings Identify HDAC3 as a Key Regulator in Hepatic Differentiation of Human Pluripotent Stem Cells. Stem cell reports. VOLUME 11, ISSUE 1, P2231. DOI:https://doi.org/10.1016/ j.stemcr.2018.05.001

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