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CRISPR a / i及其应用

日期:2019年1月31日 17:29

基因功能研究最常用的方法是在减少或阻断基因的表达后进行表型分析。CRISPRa也称为CRISPR激活 (CRISPR activation) ,让dCas9与不同的转录激活子结合发挥上调靶基因表达的作用。CRISPRi也称为CRISPR抑制 (CRISPR interference or inhibition) 。dCas9与转录抑制子连接,如KRAB(Kruppel associated box),dCas9-KRAB融合蛋白在gRNA指引下,结合到靶基因TSS位点,抑制转录起始,沉默靶基因的表达。CRISPR激活(CRISPRa)和CRISPR抑制(CRISPRi)特别适合分析非编码RNA的具体功能。此外,因为CRISPRi必须在转录起始位点附近才能发挥作用,CRISPR系统脱靶效应比RNAi少得多。

 

健康科技

服务应用:

1. 基因表达降低(Knockdown):适用于编码和非编码基因。可与CRISPR-KO或RNAi互补。

2. 基因过表达(Overexpression):适用于编码和非编码基因。可实现基因在内源环境中过表达。

3. 基因定位:dCas9与荧光蛋白融合表达,可以对靶基因所在的染色体定位进行示踪。

4. 诱导iPS:可利用CRISPRi来诱导iPS,或大规模筛选细胞全能性相关基因。

5. 高通量遗传筛选:可以利用CRISPRi/CRISPRa找到肿瘤细胞中的调节通路或易感基因、鉴定组织发育或细胞分化中的重要基因。

服务流程

健康科技 

服务优势:

1. 设计多条gRNAs可同时对多个靶基因进行调控。

2. dCas9介导的基因调控是可逆的,不会永久性地修饰基因组DNA。

3. CRISPRi/CRISPRa复合物必须在转录起始位点附近才能发挥作用,因此降低了脱靶效应。

服务内容:

服务项目

内容

周期

价格

交付形式

CRISPR激活(CRISPRa)模块定制服务

dCas9与不同的转录激活子结合发挥上调靶基因表达的作用

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CRISPRa质粒(或病毒)
实验报告

CRISPR抑制(CRISPRi)模块定制服务

dCas9与转录抑制子连接,融合蛋白在gRNA指引下,结合到靶基因TSS位点,抑制转录起始,沉默靶基因的表达

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CRISPRi质粒(或病毒)
实验报告

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所属类别: CRISPR基因编辑

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